雙波懸浮細(xì)胞電穿孔儀是一種用于細(xì)胞轉(zhuǎn)染的儀器。在分子生物學(xué)和細(xì)胞遺傳學(xué)研究中，需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行外源性DNA、RNA的導(dǎo)入，可以快速地實(shí)現(xiàn)外源性DNA、RNA等分子的導(dǎo)入，為科學(xué)家們提供了較為簡(jiǎn)單細(xì)胞轉(zhuǎn)染手段。當(dāng)然，在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中要注意安全規(guī)范，同時(shí)積極進(jìn)行技術(shù)優(yōu)化與設(shè)備維護(hù)，以取得更加準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，以達(dá)到基因敲除、表達(dá)等功能，這就需要采用各種工具來(lái)完成細(xì)胞膜的穿透和細(xì)胞轉(zhuǎn)染。依靠高壓脈沖電場(chǎng)作用于細(xì)胞時(shí)產(chǎn)生的短暫通道效應(yīng)將載體DNA或siRNA等物質(zhì)導(dǎo)入到細(xì)胞內(nèi)。
雙波懸浮細(xì)胞電穿孔儀操作步驟：
1.準(zhǔn)備穿孔室，并注入上述包含DNA或RNA的溶液。
2.在系統(tǒng)開(kāi)啟前對(duì)通道線(xiàn)路進(jìn)行檢查，確保線(xiàn)路連接穩(wěn)定且指示燈正常運(yùn)行。
3.將含有目標(biāo)細(xì)胞的懸浮液加入離子體。
4.使用裝置進(jìn)行預(yù)設(shè)處理?xiàng)l件的優(yōu)化(如選擇不同的脈沖電場(chǎng)強(qiáng)度、持續(xù)時(shí)間、寬度、頻率等參數(shù))，根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要進(jìn)行選擇，并記錄下設(shè)定參數(shù)。
5.將準(zhǔn)備好的細(xì)胞懸浮液放入穿孔室中，在設(shè)定好的條件下進(jìn)行穿孔操作。
6.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后清洗設(shè)備及穿孔室。
7.將處理后的細(xì)胞用適當(dāng)培養(yǎng)基保存并觀察。
雙波懸浮細(xì)胞電穿孔儀注意事項(xiàng)：
·進(jìn)行轉(zhuǎn)染時(shí)，務(wù)必使用無(wú)菌實(shí)驗(yàn)方式，以避免微生物對(duì)細(xì)胞的影響。
·在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中要注意細(xì)胞的狀態(tài)和數(shù)量，并盡可能避免機(jī)械振動(dòng)等情況的干擾。
·應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要逐步優(yōu)化電場(chǎng)條件，但同時(shí)注意不要超出細(xì)胞能承受的范圍，避免重大損傷甚至死亡。
·在使用中應(yīng)定期進(jìn)行設(shè)備維護(hù)與保養(yǎng)，以保障其性能及數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。
