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一文帶您詳細了解方波電穿孔儀

更新時間:2022-09-20      點擊次數:850
  方波電穿孔儀用于細菌、酵母和其他眾多微生物的電擊轉化,轉化時,高壓電脈沖作用于懸浮在小體積高阻介質中的樣品。本系統由一個脈沖發生器(pulse generator)模塊、一個電擊腔(shocking chamber)和一個裝有電極的電擊杯(cuvette)組成。樣本放置于電擊杯的電極之間。Micropulser模塊包含一個電容器,將電容器充電至高電壓,然后模塊將電容器中的電流放電到試管中的樣品中。
 
  方波電穿孔儀的電容放電電路產生具有指數衰減波形的電脈沖。當電容器放電至樣品時,跨越電極的電壓迅速上升至電壓(or峰值電壓,peak voltage/·也稱為初始電壓,Vo),并隨時間(t)減小,如下式:
 
  其中T=R·C,為時間常數,是脈沖長度的簡便表達式。
 
  R為電路電阻,單位為ohms(歐姆)。
 
  C為電容,單位為microfarad(微法拉)。
 
  根據方程1,T是電壓下降至峰值電壓1/e(~37%)的時間。MicroPulser的內部電路被設計以使E.co、釀酒酵母及其他許多微生物可以得到電穿孔,轉化效率發生在大約5ms的時間常數內。這些電穿孔條件是通過使用10微法拉電容器和將600歐姆電阻與樣品池并聯以及將30歐姆電阻與樣品池串聯來實現的。
 
  方波電穿孔儀除時間常數外,電場強度是另一個決定轉化效率的重要參數。電場強度E,是施加于電極間的電壓,其中,V為施加的電壓,d為電極間的距離,單位為cm。電場強度和細胞的尺寸(size)決定了橫貫每個細胞的電壓降,正是電壓降可能是電穿孔中電壓效應的重要表現。30歐姆串聯電阻的目的是在發生電弧的情況下保護設備電路。在正常操作條件下,當樣本在高電阻介質中,電阻不會影響施加在樣本上的電壓。但是,當樣本的電阻較低時,電阻將降低施加在樣品上的電壓。
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